結締組織

結締組織含有3種纖維，即膠原纖維、網狀纖維和彈力纖維。這3種纖維廣泛分布于人體和動物身體各處，具有營養、支持、防御保護和創傷修復等功能。這3種纖維在HE染色時不宜區分，可通過特染加以鑒別。

(一)膠原纖維

膠原纖維主要是由成纖維細胞產生的一種膠原蛋白絞鏈而成，是結締組織3種纖維中含量最多、分布最廣的一種纖維，在皮膚、鞏膜和肌腱中尤為豐富。膠原纖維分子中含有堿性氨基酸，能夠與酸性染料進行結合反應。

Masson 三色染色法

1、染色步驟

①脫蠟至水：二甲苯Ⅰ5min，二甲苯Ⅱ5min，二甲苯Ⅲ5min，無水乙醇1min，95%乙醇1min，75%乙醇1min，自來水沖洗數秒；

②用配置好的Weigert鐵蘇木素染色液染色8分鐘；

③酸性乙醇分化液分化15秒，水洗；

④Masson藍化液返藍5分鐘，水洗。蒸餾水洗1分鐘；

⑤麗春紅品紅染色液染色5分鐘；

⑥弱酸工作液洗1分鐘；

⑦磷鉬酸溶液洗1分鐘，弱酸工作液洗1分鐘；

⑧苯胺藍染色液染2分鐘，弱酸洗1分鐘；

⑨脫水透明：95%乙醇快速脫水2-3秒，無水乙醇脫水3次，每次5-10秒，二甲苯透明3次，每次1-2分鐘，中性樹膠封固；

2、結果：膠原纖維、黏液、軟骨呈藍色(如亮綠液染色為綠色)，胞質、肌肉、纖維素、神經膠質呈紅色，胞核黑藍色。

3、注意事項

(1)麗春紅酸性品紅液經磷鉬酸分化時須在顯微鏡下控制至肌纖維清晰為止。

(2)用亮綠代替苯胺藍染料，膠原纖維被染成綠色。

(3)用Weigert鐵蘇木色精染細胞核，著色深不易褪色。

4、應用 膠原纖維染色主要用于幫助判斷梭形細胞腫瘤的來源，如是否為纖維性腫瘤，也可用于顯示組織或器官的損傷、修復與纖維化情況，如早期肝硬化、心肌瘢痕灶等纖維組織增加或減少性病變。

(二)網狀纖維

網狀纖維是結締組織內的一種交錯排列的纖細纖維，交織堆集呈致密網狀，故得名。網狀纖維是構成組織的網狀支架，在HE染色時不易被辨別，銀氨溶液浸染能使其變成黑色，故該纖維又稱為嗜銀纖維。染色的基本原理為網狀纖維表面的糖蛋白與銀化合物結合，再經過甲醛還原成為金屬銀沉淀于纖維內。網狀纖維染色可顯示網狀纖維及基底膜物質，其中網狀纖維主要由Ⅲ型膠原纖維組成，在機體結締組織中廣泛存在；基底膜主要由Ⅳ型膠原及層粘連蛋白組成。

Gomori 銀染色法

1、染色步驟

(1)石蠟切片常規脫蠟至水。

(2)高錳酸鉀液氧化5min,自來水洗1min。

(3)草酸液漂白2min，水洗2min

(4)硫酸鐵銨液媒染5min，水洗1min，蒸餾水洗2次。

(5)Gomori銀氨液3min，蒸餾水洗2次。

(6)10%甲醛液還原5min，蒸餾水浸洗2次。

(7)常規乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。

2、結果：網狀纖維呈黑色，核灰色，其他組織呈對比染色的顏色

3、注意事項

(1)配制銀氨液所需器皿要洗干凈，所用的蒸餾水要純。

(2)配制銀氨液時加氨水要適量，不能過多，也不能過少。配好后的銀氨液遇光或受空氣作用后易解離析出銀鹽，故需密封避光保存。銀氨液一般宜新鮮配制，置于4℃冰箱中可保存數天。

(3)避免染色時間過長出現銀顆粒沉淀。

4、應用 網狀纖維染色在腫瘤病理診斷中具有鑒別診斷作用：①區分癌與肉瘤，網狀纖維包繞癌巢周圍，而不存在于巢內癌細胞間；大多數肉瘤則在單個瘤細胞間可見較豐富的網狀纖維；②區分某些間葉組織腫瘤：如在典型的纖維肉瘤中，具有豐富的網狀纖維且分隔包繞單個瘤細胞；典型的惡性外周神經鞘膜瘤中，網狀纖維則與梭形細胞平行分布，并不包繞瘤細胞。除應用于腫瘤性病變，網狀纖維染色還可以幫助觀察肝組織病變處的網狀支架塌陷、破壞或增生等改變。

(三)彈力纖維

彈力纖維廣泛分布于身體各處，特別在肺泡、動脈壁、支氣管及皮膚等處最為豐富。其主要成分為含有豐富二硫鍵(R-S-S-R)的糖蛋白，故又稱為彈力蛋白。

醛品紅染色法

1、染色步驟

(1)石蠟切片常規脫蠟至水

(2)Lugol碘處理5min,稍水洗

(3)5%硫代硫酸鈉水溶液處理5min，流水沖洗5min

(4)70%乙醇稍洗。

(5)醛品紅染10min。

(6)70%乙醇浸洗2次，每次約30s，至切片不再脫色為止，稍水洗。

(7)橙黃G染液染約Is，稍水洗。

(8)常規乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。

2、結果 彈力纖維深紫色，黏液紫色(肥大細胞顆粒、胰腺B細胞顆粒、垂體B細胞均能同時著色)，背景呈不同程度的黃色。

3、注意事項

(1)醛品紅溶液置4℃冰箱內保存，可保存6個月，使用時需恢復至室溫，若保存時間過長，則染色時間亦要加長。

(2)橙黃G溶液要淡染，以避免掩蓋彈力纖維的顏色。

4、應用 彈力纖維染色常用于觀察病變中彈力纖維是否增生或破壞，如肺氣腫等的彈力纖維斷裂、變性或萎縮；高血壓病的小動脈管壁彈力纖維異常增生；動脈粥樣硬化癥時動脈管壁彈力纖維的崩解、斷裂與缺失；皮膚組織病變中彈力纖維增生、卷曲、變性、崩解等變化，以及各種實驗動物組織中的血管壁損害和增生等情況。此外，彈力纖維染色對彈力纖維瘤的診斷有決定作用。